DNA TEST

Prinsipper for DNA profilering

DNA (deoksyribonukleinsyre) er det molekylet som er bærer av vår genetiske informasjon. DNA molekylet er likt i alle kroppens nukleære celler. Mesteparten av vårt DNA er likt mellom individer, men noen arvede områder varierer fra person til person. Identifisering av en gruppe slike polymorfiske DNA områder kalt "Short Tandem Repeats" (STRs) benyttes i rettsgenetiske analyser.

Antallet av repetisjoner av STR sekvenser er karakteristiske for hvert individ, likeså hvorvidt de er hetero- eller homozygote, dvs. arvet med lik eller ulik størrelse. Det arves en allele- eller kopi- fra hver av foreldrene. Ved å sammenligne flere STR områder i en persons DNA produseres en DNA-profil, eller en "strek kode" for den personen. Enkelte STR områder kan være like lange hos forskjellige personer. Hyppigheten av enkelte STR repetisjoner er dessuten karakteristiske for forskjellige etniske grupper. Derfor analyserer GENA 15 STR områder samt XY kjønnskromosomet som gir den beste identifiseringen tilgjengelig.

Sammenligning av en persons DNA profil med DNA fra et åsted kan eliminere uskyldige personer, men kan også gi en sterk indikasjon på tilknytning. Ved biologisk slektskap arves profilene i følge Mendelsk arvelære. Et barn får 50 % av sitt DNA fra mor og 50 % fra far. Dette fremgår således av barnets STR profil i sammenligning med dets foreldres.

Identifisering av STR-markørene utføres ved bruk av elektroforese. I denne teknikken separeres DNA fragmentene etter størrelse, og avgir en karakteristisk DNA profil.

HVORDAN FOREGÅR EN DNA ANALYSE

En munncelleprøve (spytt) blir avsatt på et FTA-DNA kort. Når prøven ankommer GENAs laboratorium, blir den registrert i LIMS (Laboratory Information Management System) og påført en strekkode. En DNA analyse består av 4 hoveddeler.

1. I første trinn stanses det ut en liten papirbit av FTA-DNA kortet. Stansemaskinen registrerer FTA-DNA kortets GENA-påførte strekkode, og en utstanset bit av kortet overføres til et 96-brønners PCR brett.

2. Deretter oppkopieres DNA fra papirbiten ved hjelp av PCR teknikk (polymerase kjede reaksjon). 15 definerte korte DNA fragmenter (short tandem repeats-STRs) blir identifisert og fremskaffer sammen med kjønnskromosom-påvisning personens unike DNA profiler. GENA analyserer 15 STR områder samt XY kjønnskromosomet som gir den beste identifiseringen tilgjengelig i dag, og gir en diskrimineringsfaktor på 5,01 x 10-18. Det betyr at det ikke har levd noe annet menneske på jorden med samme DNA profil.

3. Identifisering av STR-markørene utføres ved bruk av elektroforese. I denne teknikken separeres DNA fragmentene etter størrelse, og avgir en karakteristisk DNA profil. En persons DNA profil kan beskrives som en unik "strekkode" for den personen.

Kapillær elektroforesen utføres ved bruk av 3130 Genetic Analyzers fra Applied Biosystems.

4. GENA utarbeider en rapport til oppdragsgiver som f. eks. gir en konklusjon om et slektsforhold basert på sammenligningen av DNA-analyser.